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非極性色譜柱廠家分析色譜柱常見問題集錦
非極性色譜柱廠家談色譜柱常見問題集錦：
1.拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)？
新柱活化，實(shí)際上是一個(gè)平衡的過程，除了用流動(dòng)相平衡外，有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡，特別是測(cè)定分子量比較高的多肽，尤其重要。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子，擴(kuò)散速度慢，平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng)。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。
如果要加快平衡時(shí)間，把前面用來平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。
2.非極性色譜柱的技術(shù)都有哪些？這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里？
非極性色譜柱廠家色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。
3.色譜柱技術(shù)的差距在哪里？
液相色譜柱裝填實(shí)際上是有一定技巧和程序，可能還有一些運(yùn)氣。一般使用高壓勻漿方法裝填。也就是能讓填料在溶劑內(nèi)均勻地懸浮。然后用瞬間高壓壓實(shí)，這實(shí)際上用到了不同比例的勻漿液體，和合適的壓力。壓力太大，顆粒破碎，壓力太小，塔板數(shù)少。同時(shí)壓力需要穩(wěn)定，不然分布不均，拖尾嚴(yán)重。同時(shí)還有頭上平整程度。套上套，就可以用了。
4.多個(gè)樣品不好不離的時(shí)候，該怎么通過選擇合適的色譜柱來提高分離度？
提高分離度可從三個(gè)主要影響因素來考慮，柱效、選擇性和保留因子?？赏ㄟ^減小填料粒徑和增加柱長(zhǎng)提高柱效；選擇性和固定相選擇以及pH條件有關(guān)，通過選擇合適的色譜柱和合適的pH，可以提高選擇性；有時(shí)候適當(dāng)延長(zhǎng)出峰時(shí)間增加保留因子，也可提高分離度。
1.拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)？
新柱活化，實(shí)際上是一個(gè)平衡的過程，除了用流動(dòng)相平衡外，有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡，特別是測(cè)定分子量比較高的多肽，尤其重要。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子，擴(kuò)散速度慢，平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng)。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。
如果要加快平衡時(shí)間，把前面用來平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。
2.非極性色譜柱的技術(shù)都有哪些？這些技術(shù)在應(yīng)用時(shí)都體現(xiàn)在哪里？
非極性色譜柱廠家色譜柱技術(shù)包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料技術(shù)自不待言，填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)也沒有想象中的這么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床，更多是一門藝術(shù)，需要經(jīng)驗(yàn)積累。
3.色譜柱技術(shù)的差距在哪里？
液相色譜柱裝填實(shí)際上是有一定技巧和程序，可能還有一些運(yùn)氣。一般使用高壓勻漿方法裝填。也就是能讓填料在溶劑內(nèi)均勻地懸浮。然后用瞬間高壓壓實(shí)，這實(shí)際上用到了不同比例的勻漿液體，和合適的壓力。壓力太大，顆粒破碎，壓力太小，塔板數(shù)少。同時(shí)壓力需要穩(wěn)定，不然分布不均，拖尾嚴(yán)重。同時(shí)還有頭上平整程度。套上套，就可以用了。
4.多個(gè)樣品不好不離的時(shí)候，該怎么通過選擇合適的色譜柱來提高分離度？
提高分離度可從三個(gè)主要影響因素來考慮，柱效、選擇性和保留因子?？赏ㄟ^減小填料粒徑和增加柱長(zhǎng)提高柱效；選擇性和固定相選擇以及pH條件有關(guān)，通過選擇合適的色譜柱和合適的pH，可以提高選擇性；有時(shí)候適當(dāng)延長(zhǎng)出峰時(shí)間增加保留因子，也可提高分離度。
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